ASP探針，即變構信號探針，是一種通過構象變化來輸出熒光信號的探針，常用于生物傳感和PCR檢測中。提升ASP探針的檢測準確性，關鍵在于優化其設計、實驗條件和數據分析。具體介紹如下：
ASP探針提升檢測準確性的方法
- 優化探針設計：通過裁剪和優化適配體序列，設計出具有高親和力和穩定性的二價適配體，作為ASP探針。例如，對原始適配體進行粗細裁剪，以獲得最適合設計成變構信號探針的序列。
- 實驗條件優化：優化實驗條件，如鈉離子濃度、鎂離子濃度、孵育時間等，以提高ASP探針的檢測性能。例如，本研究最終獲得的最佳條件是：鈉離子濃度為0，鎂離子濃度為10 mM，孵育時間為30 min。
- 數據分析與驗證：通過qRT-PCR獲得Ct值來評估探針與靶標的結合親和力，確保探針的特異性和準確性。例如，加標β-LG的平均回收率為87.6% ~ 99.9%，RSD≤4.1%，表明該方法對實際樣品中β-LG的檢測具有較高的準確性。
ASP探針在生物傳感和PCR檢測中的應用
- 生物傳感：ASP探針可用于免標記熒光磁性生物傳感器中，實現對食品中痕量過敏原的檢測。這種傳感器具有成本低、檢測快速、特異性強、準確度高的優勢。
- PCR檢測：ASP探針也可用于qPCR中，通過熒光共振能量轉移原理，實現對靶標的定量和分類。例如，TaqMan探針和MGB探針是常見的熒光探針類型，用于提高PCR檢測的特異性和靈敏度。
ASP探針與其他探針技術的比較
- TaqMan探針：TaqMan探針是一種寡核苷酸探針，其5’末端攜帶熒光基團，3’端攜帶淬滅基團。當探針完整時，熒光信號被淬滅基團吸收，探針被水解后，熒光信號可以被檢測到。MGB探針是在TaqMan探針的基礎上做的優化改進，通過加入小溝結合物（MGB）來提高探針的TM值和雜交反應的特異性。
通過上述方法，可以有效提升ASP探針在生物傳感和PCR檢測中的準確性，從而在各種應用中發揮更大的作用。
